国产72型分光光度计的基本工作原理与单光电池光电比色计类似，但分光光度计的单色光器比滤光片所选择的波长范围小得多，可以近似看作单色光。此外，它还加设了稳定电压的专门装置和更精密的微电流检流计，并单独设置了一个装置系统。为了方便携带和运输，72型分光光度计被制作成三个组成部分。
图7－28展示了72型分光光度计的光学系统工作原理示意图。
光源1发出白光，经过光狭缝2射到反射镜3，反射到聚光透镜4后，成为平行光射入棱镜5。经棱镜折射色散后，各种波长的单色光排列成光谱的形状射在镀铝的反射镜6上，反射镜可以转动选择某种所需波长的单色光反射到聚光透镜7上（与反射镜装在一个控制盘上）。从透镜7射出的光是单色的平行光，经过出光狭缝8射到盛有色溶液的比色槽9。没被溶液吸收的透过光，经光亮调节器10射到硒光电池11上，光电池产生的光电流产生磁场带动镜式检流计映出光亮点射在检流计的标尺上。通过读取数据并进行计算，可以求出溶液中所含物质的量。
为了方便叙述，参考图7－29，说明了72型分光光度计的外形示意图及部件连接。
操作方法如下：
1. 按照接线要求将稳压器和微电流计接在单色器上。
2. 插上电源，确保电源电压与仪器电压相符。
3. 将单色光器的光路闸门扳到关闭位置，然后将微电流计上的电源开关打开。此时，光亮点将出现在检流计标尺上。使用0点调节器将光亮点准确地调至透光率标尺的0刻度上。
4. 打开稳压器的电源开关和单色器的光源开关，将光路闸门扳到打开位置，并以顺时针方向调节光亮调节器，使光亮点接近标尺上限。停留10分钟后，待光电池稳定后再进行操作。
5. 将单色光器上的光路闸门扳回关闭位置，重新校正微电流计的指示光亮点至0位，然后立即打开光路闸门。
6. 打开比色槽暗厢盖，取出比色槽架，将其中一只比色槽装入蒸馏水或空白溶液，将其余三只装入待测样品溶液。将比色槽放置在架上，将空白溶液槽放在第一格上，然后放回暗厢并盖好。首先将空白溶液槽推入光路。
7. 使用波长调节器选择所需波长并对准红线。然后，以顺时针或逆时针方向轻轻转动光亮调节器，使光亮点中线准确地对准透光率100的刻度上。
8. 调节好后，可以进行样品溶液的比色测定。将比色槽的定位装置拉出一格，使第二个比色槽内的待测溶液进入光路。此时，微电流计标尺上光亮点所指示的读数即为该溶液的光密度或透光率。依此测定第二、第三个待测溶液，并读出数据。
9. 在使用过程中，应经常关闭光路闸门以核对微电流计的0点位置是否有变化。如有变化，应及时使用0点调节器进行纠正。
需要注意的是，某一测定溶液所需的波长往往有一个范围，即有几个波长均可用于该溶液的吸收光带。一般来说，应选择吸收度最大的波长。
所制成的溶液浓度应尽量使光密度值在0.1～0.6的范围内进行测定，以减小读数误差。如果光密度超出了0.1～0.6的范围，可以调节溶液浓度，稀释或加浓，或者选择适当波长的单色光。
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