细胞永生化是当前细胞生物学研究的热点之一。细胞永生化是指细胞获得持续生长增殖能力的特性，使细胞具有无限增殖生长性，并多伴有核型改变。细胞永生化是癌变的必经途径。然而，正常组织来源的原代细胞在体外培养条件下经过有限次的细胞传代后就会停止增殖，限制了细胞培养技术的应用。为了解决这个问题，学者们通过基因转染等技术将外源性永生化基因导入目的细胞内，以增加永生化的发生率，进而建立永生化细胞株，使体外培养的细胞具有无限增殖能力，实现细胞间无差异。
然而，商品化的传代细胞系与体内相应部位的细胞相比已经发生了功能和形态上的变化，不能真实模拟体内细胞分化的细胞类型。相比之下，原代细胞发育和分化能够更好地模拟病毒感染动物的体内微环境，因此原代细胞成为构建平台细胞的首选。
1、端粒酶转染法：通过表达端粒酶逆转录酶(hTERT)来激活端粒酶活性，维持端粒长度，阻止染色体端粒降解，从而诱导上皮细胞永生化。端粒酶转染建立的永生化细胞可以保持正常细胞的生理特性。
2、回复性永生：利用条件基因敲除技术(Cre/LoxP系统)和转基因技术联合诱导细胞永生化，也被称为可回复性永生化技术。
[1]吴萌，殷建忠，朱武洋；原代细胞永生化的研究进展。《国际病毒学杂志》
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