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如何使用小鼠Β内啡肽受体(Β-EPR)ELISA试剂盒进行实验? 1

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本试剂盒采用双抗体夹心法来测定样本中小鼠Β内啡肽受体(Β-EPR)的水平。首先,在微孔板上包被纯化的小鼠Β内啡肽受体(Β-EPR)抗体,形成固相抗体。然后,依次加入小鼠Β内啡肽受体(Β-EPR)样本和标记有HRP的小鼠Β内啡肽受体(Β-EPR)抗体,使其结合形成抗体-抗原酶标抗体复合物。经过洗涤后,加入底物TMB进行显色反应。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,然后在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中的小鼠Β内啡肽受体(Β-EPR)呈正相关。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠Β内啡肽受体(Β-EPR)的浓度。

试剂盒组成

使用小鼠Β内啡肽受体(Β-EPR)ELISA试剂盒需要注意的事项

1. 从冷藏环境中取出试剂盒后,应在室温平衡15-30分钟后再使用。未使用完的酶标包被板应装入密封袋中保存。

2. 浓洗涤液可能会结晶析出,稀释时可在水浴中加温帮助溶解,结晶不会影响洗涤结果。

3. 在各个步骤中使用加样器,并经常校对其准确性,以避免实验误差。每次加样的时间最好控制在5分钟内,如果样本数量较多,推荐使用排枪加样。

4. 每次测定时,请同时制作标准曲线,并最好做复孔。如果样本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先使用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(XnX5)。

5. 封板膜只能一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物请避光保存。

7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

8. 所有样品、洗涤液和废弃物都应按传染物处理。

9. 不同批号的试剂盒组分不得混用。

10. 如与英文说明书有出入,请以英文说明书为准。

主要参考文献

[1] 薛建中 方之扬;烧伤病人T淋巴细胞膜β内啡肽受体的改变及其临床意义。《中华整形烧伤外科杂志》1992年第2期 102-104。

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