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大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒的实验原理是什么? 1

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大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA检测试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)捕获抗体的微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育和洗涤。然后使用底物TMB进行显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中的大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)呈正相关。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),并计算样品浓度。

试剂盒的组成

大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA检测试剂盒有哪些产品优势?

1. 产品品种齐全、质量可靠、灵敏度高、稳定性好、操作简便。

2. 特异性:不与其他可溶性结构类似物交叉反应。

3. 重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%。

如何操作大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒?

1. 从室温平衡20分钟后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔中加入不同浓度的标准品50uL。

3. 样本孔中加入待测样本50uL,空白孔不加。

4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100uL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60分钟。

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350uL),静置1分钟,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50uL,37℃避光孵育15分钟。

7. 每孔加入终止液50uL,15分钟内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

主要参考文献

[1] 崔彩云;杜永成;胡晓芸;李毅;吸烟对致敏大鼠气道组蛋白去乙酰化酶2及血清中白介素8表达的影响。《中华哮喘杂志(电子版)》

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