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如何测定药物中的白术内酯 III含量? 1

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在确定药物中的白术内酯 III含量的过程中,准确的测定方法至关重要,本文将探讨不同的测定技术,以确保对该化合物含量的准确评估。


简述:白术内酯 III(atractylenolide III,AT III)是我国传统中药白术的提取物,药理作用有:抗病毒、抗血小板聚集、抗肿瘤、调节胃肠道功能和抗炎等作用。随着研究的深入,有学者发现白术内酯Ⅲ能显著抑制脂多糖刺激的小鼠 RAW264.7 巨噬细胞 TNF-α、IL-6 和 PGE 的分泌。白术内酯Ⅲ可抑制肥大细胞增殖,抑制促炎细胞因子,如 IL-6、IL-8、 IL-1β、TNF-α。此外,白术内酯Ⅲ可以显著改善痴呆大鼠的学习记忆能力;增加大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞活力,降低乳酸脱氢酶的释放,抑制促炎细胞因子 TNF-α的释放,对 PC12 细胞发挥神经保护作用。


含量测定:

1. 报道一

陈雪芬等人建立同时测定附子理中丸中甘草苷、甘草酸铵、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Chanin HPU-C18 (4.6 mm×250 mm,5μm),以流动相A(乙腈)和流动相B(0.05%磷酸溶液)进行梯度洗脱,柱温35℃,流速为1.0 m L·min-1,检测波长为237nm。甘草苷、甘草酸铵、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ检测浓度分别在0.46~46 mg·L-1(r=0.9999)、1.35~135 mg·L-1(r=0.9999)、0.33~3.3 mg·L-1(r=0.9996)、0.42~4.2 mg·L-1(r=0.9998)范围内线性关系良好;平均加样回收率在(n=9)分别为100.9%、100.1%、98.3%和99.1,RSD分别为0.8%、1.0%、1.6%、1.4%。该方法简便、准确、重复性好,可用于同时测定附子理中丸中甘草苷、甘草酸、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ的含量。


2. 报道二

赵昕等人建立一测多评法同时测定小儿扶脾颗粒中党参炔苷、柚皮芸香苷、橙皮苷、白术内酯Ⅲ和白术内酯Ⅰ的含量。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm5μm)以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱流速为0.8ml·min-1柱温30℃检测波长分别为269 nm(检测党参炔苷)、300 nm(检测柚皮芸香苷和橙皮苷)和220 nm(检测白术内酯Ⅲ和白术内酯Ⅰ)。以橙皮苷为内标物建立党参炔苷、柚皮芸香苷、白术内酯Ⅲ和白术内酯Ⅰ的相对校正因子测定其含量。


结果:党参炔苷、柚皮芸香苷、橙皮苷、白术内酯Ⅲ和白术内酯Ⅰ分别在4.3687.20μg·ml-13.9278.40μg·ml-16.56131.20μg·ml-12.1843.60μg·ml-11.7434.80μg·ml-1范围内线性关系良好平均加样回收率(RSD)分别为98.78%(1.05%)97.79%(0.99%)99.62%(0.85%)97.26%(1.43%)和96.85%(1.17%)一测多评法计算值与外标法实测值差异无统计学意义(P>0.05)。一测多评法可以用于小儿扶脾颗粒中5个成分的含量测定及质量控制。


3. 报道三

曹淑丽等人采用UPLC法建立参苓白术散中补骨脂素、异补骨脂素、白术内酯Ⅲ和异欧前胡素的含量测定方法。方法采用Universil XB-C8柱(150 mm×2.1mm1.8μm)流动相为甲醇(A)-体积分数为0.1%的磷酸水溶液(B)进行梯度洗脱检测波长:254 nm进样量:5μL流速:0.2 ml·min-1柱温:35℃。补骨脂素、异补骨脂素、白术内酯Ⅲ和异欧前胡素质量浓度的线性分别为2.5080.00、2.5080.00、7.50240.00、2.5080.00 mg·L-1相关系数分别为0.9997、0.9999、0.9997、0.9999平均回收率分别为99.7%、98.5%、97.6%、100.3%RSD分别为1.0%、0.8%、1.0%、1.2%(n=6)。方法可为参苓白术散的质量控制提供实验依据。


4. 报道四

桂元等人建立梯度洗脱联合波长切换高效液相色谱(HPLC)法对参苓健体粉中去氢土莫酸、去氢茯苓酸、茯苓酸、白术内酯Ⅲ和白术内酯Ⅰ同时进行测定。方法为:采用Venusil MP C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–0.05%磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长:210 nm(019 min,检测去氢土莫酸、去氢茯苓酸和茯苓酸)、220 nm(1935 min,检测白术内酯Ⅲ和白术内酯Ⅰ);体积流量:0.8 m L/min;柱温:30℃;进样量为10μL。


结果:去氢土莫酸、去氢茯苓酸、茯苓酸、白术内酯III、白术内酯I质量浓度分别在4.6292.40μg/m L(r=0.9997)、3.8076.00μg/m L(r=0.9999)、5.76115.20μg/m L(r=0.9999)、3.9579.00μg/mL(r=0.9998)、5.05101.00μg/mL(r=0.999 6)与峰面积关系良好;回收率分别为99.24%、97.75%、98.66%、98.49%、99.10%,RSD值分别为1.23%、1.79%、1.66%、0.80%、1.25%。该方法操作简便、结果可靠,可用于参苓健体粉的质量控制。


参考文献:

[1]陈雪芬,徐鹏鹤,欧晓阳. HPLC法同时测定附子理中丸中甘草苷、甘草酸铵白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ的含量 [J]. 中国中医药科技, 2022, 29 (01): 41-44.

[2]周玉. 白术内酯Ⅲ的抗抑郁作用及其机制的研究[D]. 湖南师范大学, 2021. DOI:10.27137/d.cnki.ghusu.2021.002615.

[3]赵昕,何彦瑶. 一测多评法同时测定小儿扶脾颗粒中党参炔苷、柚皮芸香苷、橙皮苷、白术内酯Ⅲ和白术内酯Ⅰ [J]. 中国药师, 2018, 21 (11): 2045-2048.

[4]曹淑丽,赵春杰,蔡丽侠等. UPLC法同时测定参苓白术散中补骨脂素、异补骨脂素、白术内酯Ⅲ和异欧前胡素的含量 [J]. 沈阳药科大学学报, 2018, 35 (07): 568-573. DOI:10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2018.07.010.

[5]桂元,薛承斌,詹继东等. HPLC法测定参苓健体粉中去氢土莫酸、去氢茯苓酸、茯苓酸、白术内酯Ⅲ和白术内酯Ⅰ [J]. 现代药物与临床, 2016, 31 (09): 1331-1334.

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