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SW48细胞的特点及应用研究? 1

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背景[1-3]

SW48细胞是一种源自结肠腺癌的细胞系,具有合成癌胚抗原和裸鼠成瘤的能力。

W480细胞源自原位直肠腺癌,不表达CSAp和直肠抗体。该细胞中p53基因发生突变,导致蛋白表达水平升高。此外,癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表达呈阳性。细胞不表达与肿瘤入侵相关的金属蛋白酶细胞溶解酶,但有报道称该细胞表达GM-CSF。此外,该细胞中ras原癌基因的12位密码子发生突变,可用于PCR法检测该突变的阳性对照。

SW48细胞的处理方法:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:当细胞密度达到80%-90%时,可进行传代培养。

1.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若SW48细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

2.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

3.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

SW48细胞的应用研究[4][5]

AF1q在人结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞增殖及侵袭转移的影响研究

本研究旨在探讨AF1q在结直肠癌细胞系及肿瘤组织中的表达情况,并研究其与结直肠癌发生的相关性。

方法:通过RT-PCR和免疫组化方法比较AF1q在结直肠癌组织和癌旁组织中的表达情况,并分析其与临床病理资料的关系。利用癌症基因组图谱在线数据库(The Cancer Genome Atlas,TCGA)进行生存分析,探讨AF1q与结直肠肿瘤的预后关系。通过RT-PCR和Western Blot方法比较AF1q在不同结直肠癌细胞系中的表达情况。

结果:AF1q基因mRNA和蛋白质在结直肠癌组织中的表达水平明显高于对照癌旁组织。回归分析显示,AF1q的表达水平与结直肠癌的淋巴结转移和TNM分期密切相关。利用TCGA数据库进行的生存分析显示,AF1q高表达组的总生存率(OS)和无疾病生存率(DFS)均显著低于AF1q低表达组。在结直肠癌细胞系中,AF1q的表达水平高于正常肠上皮细胞系。

结论:AF1q的表达水平与结直肠癌患者的淋巴结转移情况、TNM分期和预后密切相关。在结直肠癌细胞系中,AF1q的表达水平高于正常肠上皮细胞系。

参考文献

[1]Epithelial–mesenchymal transition(EMT):A biological process in the development,stem cell differentiation,and tumorigenesis[J].Tong Chen,Yanan You,Hua Jiang,Zack Z.Wang.Journal of Cellular Physiology.2017(12)

[2]Acetazolamide potentiates the anti-tumor potential of HDACi,MS-275,in neuroblastoma[J].Reza Bayat Mokhtari,Narges Baluch,Micky Ka Hon Tsui,Sushil Kumar,Tina S.Homayouni,Karen Aitken,Bikul Das,Sylvain Baruchel,Herman Yeger.BMC Cancer.2017(1)

[3]Differential involvement of the microtubule cytoskeleton in insulin receptor substrate 1(IRS-1)and IRS-2 signaling to AKT determines the response to microtubule disruption in breast carcinoma cells[J].Jose Mercado-Matos,Jennifer L.Clark,Andrew J.Piper,Jenny Janusis,Leslie M.Shaw.Journal of Biological Chemistry.2017(19)

[4]PI3K signaling in cancer:beyond AKT[J].Evan C Lien,Christian C Dibble,Alex Toker.Current Opinion in Cell Biology.2017

[5]胡经纬.AF1q在人结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞增殖及侵袭转移的影响[D].华中科技大学,2017.

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