兔抗人IGG(FC)-HRP是一种以兔为宿主制得的免疫抗体,可以特异性结合人IGG(FC)。它主要用于多种免疫学实验,如Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。
免疫球蛋白(又称抗体)是哺乳类动物抵抗病原入侵的重要组成部分,其中兔抗人IGG(FC)-HRP是其中一种类型。它不仅可以提供抗体相关的免疫力,还可以通过胎盘穿透为胎儿提供被动免疫力。
不同的免疫球蛋白亚类通过与细胞表面Fc受体的相互作用,与不同类型的细胞发生作用。这些Fc受体与免疫球蛋白的亲和力、细胞分布、结构和生物学作用各不相同。白细胞和实质细胞表达的抑制性受体(FcγRⅡ)和活化的(FcγRⅠ和FcγRⅢ)Fc受体的相对平衡是调节抗体沉积引起的炎症反应的主要因素,也是疾病易感性的主要决定因素。
兔和人的免疫球蛋白Fc受体(FCγRs)都属于免疫球蛋白超家族。它们分为三型,包括高亲和力的FcγRⅠ(CD64),可以结合单体免疫球蛋白G;低亲和力的FcγRⅡ(CD32)和FcγRⅢ(CD16),它们只与免疫球蛋白G复合物相互作用。由于基因和等位基因的变化以及mRNA的选择性剪接,导致产生多种不同的FcγR型,它们的跨膜区和胞浆区有明显差异,从而导致功能的多样性。不同的FcγR型与免疫球蛋白G亚类(尤其是人免疫球蛋白G1和G2)的结合能力也不相同。FcγR的表达受细胞活化状态和细胞因子的调节。
基因重组干扰素如IFN-α(IFN-α包括IFNα-2a,IFNα-2b,IFNα-1b等)及其修饰体(如多价干扰素)已经作为抗病毒和免疫调节类药物,被广泛用于临床,治疗多种病毒性疾病和抗肿瘤等。天然的干扰素α(IFN-α)是指细胞经过诱导而表达产生的细胞因子,通过信号传导继而发挥抗病毒、抗细胞增殖和调节免疫应答作用。然而,由于IFN-α是一个小分子蛋白,在血浆中被迅速清除,导致其半衰期很短,因此在临床治疗中需要多次重复用药才能达到治疗效果。
本研究构建了编码人源IFNα-2b和免疫球蛋白Fc片段的基因重组融合蛋白。同时,对Fc片段中可诱导细胞杀伤活性的个别位点进行了改造,以降低免疫球蛋白Fc片段可能导致的副作用。构建的融合蛋白既能保持干扰素的活性并带有天然的N端,又具有抗体的优越性。融合蛋白的Fc片段的CH2和CH3区域可以用于ProteinA的亲和层析,方便蛋白纯化。此外,保留的抗体铰链link部分使两个功能分子之间互不影响。为了延长融合蛋白在血浆中的半衰期,我们通过定点突变改造了IgG的Fc片段,增强了Fc与FcRn的结合能力。此外,本研究还采用了新型的甲醇诱导型酵母表达系统,实现了高效和低成本的蛋白表达。
[1]Transforming Growth Factor-β1 and-β2 in Gastric Precancer and Cancer and Roles in Tumor-Cell Interactions with Peripheral Blood Mononuclear Cells In Vitro.Ma Gui-Fen,Miao Qing,Zeng Xiao-Qing,Luo Tian-Cheng,Ma Li-Li,Liu Yi-Mei,Lian Jing-Jing,Gao Hong,Chen Shi-Yao.PloS one.2013
[2]Role of p53 in systemic autoimmune diseases.Takatori H,Kawashima H,Suzuki K,et al.Critical Reviews in Immunology.2014
[3]Cancer:Mutant p53 rescued by aggregation inhibitor.Flemming,A.Nature Reviews Drug Discovery.2016
[4]Proliferating trichilemmal cyst:The value of ki67 immunostaining[J].Lucia Rangel-Gamboa,Magdalena Reyes-Castro,Judith Dominguez-Cherit,Elisa Vega-Memije.International Journal of Trichology.2013(3)
[5]李金晶.干扰素α和人免疫球蛋白Fc片段融合蛋白的构建与表达[D].中国科学技术大学,2011.