首先我们来介绍一下10074-G5的生物活性：
1）体外活性
10074-G5通过结合并扭曲c-Myc的bHLH-ZIP结构域，从而抑制c-Myc / Max异二聚体的形成并抑制其转录活性。在体外实验中，10074-G5能够抑制Daudi Burkitt淋巴瘤细胞的生长并破坏c-Myc / Max二聚化。细胞内浓度的最高值出现在孵育6小时后，Daudi细胞累积了10074-G5。10074-G5在4小时内能够抑制Daudi细胞中的c-Myc / Max二聚化约75％，并且通过孵育24小时能够维持该抑制。此外，10074-G5还能够降低总c-Myc蛋白的表达，与对照组相比，在暴露于10μM的10074-G5处理后，c-Myc蛋白的表达降低了约40％。10074-G5对Daudi和HL-60细胞具有细胞毒性，并且过量表达c-Myc [2]。
2）体内活性
在小鼠体内实验中，以20mg / kg的剂量静脉注射10074-G5后，其血浆半衰期为37分钟，峰值血浆浓度为58μM，比肿瘤峰值浓度高10倍。然而，由于10074-G5快速代谢为无活性代谢物，导致10074-G5在肿瘤组织中的浓度不足以抑制c-Myc / Max二聚化，因此缺乏抗肿瘤活性。在给予携带Daudi异种移植物的小鼠静脉注射20mg / kg的10074-G5后5分钟，观察到血浆中10074-G5的峰值浓度（Cmax）为58.5±2.7nmol / ml，但随后迅速下降。除了肺、肝和脂肪组织外，10074-G5在所有时间点的组织浓度均低于血浆浓度[2]。
了解了10074-G5的生物活性后，接下来我们来介绍一下如何进行活性实验。一般来说，有以下两种方法：
1）细胞实验
首先，将对数生长的3×108个Daudi细胞放入含有10μM 10074-G5的3ml完全培养基中，孵育0,1,3,6或24小时。孵育结束后，收获细胞并分成两份，每份1.5ml，然后将其覆盖在含有0.5ml硅油的微量离心管中。以12,000g的速度离心4分钟后，取出顶部1ml的培养基并储存在-70℃的冷冻小瓶中待分析。同时，小心地除去剩余的培养基和硅油，将细胞沉淀物储存在-70℃直至分析。
2）动物实验
使用携带Daudi异种移植物的C.B-17SCID小鼠进行实验。将小鼠分为以下几组（每组10只小鼠）：对照组；载体对照组（每日一次，每次0.01ml / g体重，持续5天）；阳性对照组，使用多柔比星（每4天一剂，每剂2.5mg / kg）；以及10074-G5组（每天一次，每次20mg / kg，持续5天）。按照适当的时间表给小鼠静脉注射药物，并每周记录体重和肿瘤体积[1]。
综上所述，我们已经了解了10074-G5的生物活性以及如何进行活性实验。10074-G5是一种能够抑制c-Myc-Max二聚化的抑制剂，其靶点活性为c-Myc，Ki值为2.8μM。
参考文献：
1. Yap JL, et al. Bioorg Med Chem Lett. 2013, 23(1):370-4.
2. Clausen DM, et al. J Pharmacol Exp Ther. 2010, 335(3):715-27.
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