背景:Recombinant Rat IL-21是一种具有多样性免疫调节功能的细胞因子,它与其他细胞因子如IL-2、IL-4、IL-7、IL-9和IL-15属于I型细胞因子家族成员。研究发现,IL-21在慢性病毒感染中对病毒控制和疾病转归有着重要的影响。本课题组的研究结果表明,IL-21在慢性HBV感染中起到了重要作用,并有望成为慢性HBV感染疾病免疫治疗的新靶点。
目的:本研究的目的是观察小鼠白细胞介素-21基因重组腺病毒(Ad-GFP-mIL-21)在慢性HBV感染小鼠中的表达情况,以及它对病毒清除和HBV特异性抗体产生的影响。
方法:首先,我们在体外感染HepG2.2.15细胞,通过ELISA和Western blot检测上清和细胞中mIL-21的表达。然后,我们通过尾静脉注射rAAV8-1.3HBV建立HBV持续表达模型,并在12周后将Ad-GFP-mIL-21注射到实验组小鼠体内,以注射空载GFP重组腺病毒或PBS作为对照组。我们使用荧光显微镜观察Ad-GFP-mIL-21在小鼠体内各器官的表达情况,并通过ELISA检测各组小鼠血清中HBsAg、HBsAb、HBcAb和mIL-21的水平。
结果:我们发现Ad-GFP-mIL-21可以在体外感染HepG2.2.15细胞,并且上清中mIL-21的水平与重组载体的滴度和感染时间相关。在注射Ad-GFP-mIL-21至HBV持续表达小鼠后的第4天,我们观察到绿色荧光主要在肝细胞中表达。与处理前相比,注射第4天血清中mIL-21的水平显著升高,而HBsAg的水平则明显下降。实验组小鼠和对照组小鼠在注射第13天时均为阴性。与对照组相比,实验组小鼠血清中HBcAb的水平显著升高。
结论:本研究结果表明,在HBV持续感染小鼠体内,Ad-GFP-mIL-21可以表达mIL-21,并且能够下调血清中HBsAg的水平并促进HBcAb的产生,这提示Ad-GFP-mIL-21在体内具有控制慢性HBV感染的作用。
[1]小鼠白细胞介素-21基因重组腺病毒可控制慢性HBV感染,高雪萍,周扬,郑新春,易璇,唐利波,侯金林,李咏茵.2017