质控盲样考核是每个检验工作人员都面临的问题,它锻炼了我们的实践检验能力,提高了我们的技术水平和处理病原学鉴定的能力。下面是对近年来完成上级发放的盲样未知菌考核中检测方法的分析归纳:
首先要明确检测哪类微生物:
1、根据病原菌的致病部位,如肠道致病菌、呼吸道致病菌等。
2、确定何类产品的微生物,如食品中微生物、化妆品中微生物、水质中微生物等。
根据盲样的性状制定检测方案,包括液体、固体、附着于载体上、产品(食品、化妆品、水等)。同时要确定是混合菌(一般为1~3株菌,不同种类,它们之间的比例不同)还是单一菌。
1、涂片染色、镜检:
1)判定染色反应,如革兰氏染色、抗酸染色、芽胞染色、鞭毛染色等。
2)观察菌体形态,如球菌(分散状、成堆状、链状、成双状)、杆菌(长杆菌、短杆菌、粗杆菌、细杆菌、链杆菌、弯曲杆菌等)。
2、培养:
1)根据作业指导书选择分离培养用培养基及增菌培养用培养基,从增菌培养管中挑取增菌液,进行增菌及分离培养。
2)根据盲样检测目标、盲样性状、染色镜检等信息,选择分离培养用培养基及增菌培养用培养基,进行增菌及分离培养。
3、挑取可疑菌落进行纯培养:
根据染色镜检的信息,选择菌落,包括菌落形态、色泽、光滑度、湿润程度、边缘状态等,进行纯培养。
4、生物化学试验:
根据菌落特点、染色镜检等信息,选择生物化学反应试验,如可疑为肠道致病菌,选择三糖铁培养基进行初筛,然后进行全面生物化学试验等;可疑为金黄色葡萄球菌,进行血浆凝固酶试验等。
5、血清学试验:
根据菌落形态、染色镜检、生物化学试验等信息,选择诊断血清分群、分型。
根据菌落形态、染色镜检、血清学试验、生化试验或分子生物学检测等结果,判定盲样中微生物的种类名称。