6-苄氨基腺嘌呤(6BA)含量试剂盒利用高效液相色谱法在254 nm紫外光下测定6BA的吸收峰来确定其含量。
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography HPLC)是一种重要的色谱法分支,它以液体为流动相,通过高压输液系统将不同极性的溶剂或混合溶剂、缓冲液等泵入固定相的色谱柱中,分离各成分后进入检测器进行分析。高效液相色谱法已广泛应用于化学、医学、工业、农学、商检和法检等领域。
6-苄氨基腺嘌呤(6BA)是一种植物激素,属于植物内源激素的一类。植物激素是由植物体特定部位合成并在植物体其他部位起调节作用的微量有机物。目前公认的植物内源激素共有五大类,包括生长素类、细胞分裂素类、赤霉素类、脱落酸和乙烯。
6BA具有高效、稳定、廉价和易于使用等特点,因此被广泛应用于组织培养中作为细胞分裂素。它的主要作用是促进芽的形成,并能诱导愈伤组织的发生。此外,6BA还可以提高茶叶、烟草的质量和产量,保鲜蔬菜和水果,以及培育无根豆芽等,显著提高果品和叶片的品质。
研究建立了一种超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography, UPLC)方法,用于测定豆芽中4种植物生长调节剂的含量。该方法首先使用甲醇超声提取豆芽样品,然后通过固相萃取柱Oasis HLB净化提取液,最后通过UPLC进行分析检测。实验结果表明,6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、对氯苯氧乙酸(4-CPA)和萘乙酸(NAA)的最低检出限分别为0.01 mg/kg、0.02 mg/kg、0.02 mg/kg和0.01 mg/kg,加标回收率范围为87.0%至95.5%,重复性相对标准偏差(RSD)为0.49%至0.95%,在0.0550 mg/kg范围内呈良好的线性关系(r≥0.9992)。该方法具有高灵敏度、良好的准确性和重复性,弥补了现有相关标准中只能针对单一目标物的不足,可作为一种推荐性方法在质检部门推广应用。
此外,还研究了一种超高效合相色谱(Ultra Performance Convergence Chromatography, UPC2)方法,用于测定豆芽中7种植物生长调节剂的含量。实验结果表明,吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、对氯苯氧乙酸(4-CPA)、萘乙酸(NAA)和赤霉素(GA)的最低检出限在0.001至0.003 mg/kg之间,加标回收率范围为90.7%至95.5%,重复性相对标准偏差(RSD)为1.24%至4.49%,在0.350 mg/kg范围内呈良好的线性关系(r≥0.999)。
这两种方法具有高灵敏度、良好的准确性和重复性,使用极少量的有机溶剂,具有环保健康等优点,适用于豆芽中多种植物生长调节剂的快速检测。
此外,还进行了对不同贮存条件下豆芽中6-BA含量随时间变化的动态研究。结果显示,豆芽中6-BA的含量随时间的增加而降低,在冷冻和冷藏条件下,最小半衰期分别为1.642天和3.675天,冷冻可以减缓6-BA的降解。
[1]A New Method for Determination of α-Tocopherol in Tropical Fruits by Ultra Performance Convergence Chromatography with Diode Array Detector[J].Xiao Gong,Ningli Qi,Xiaoxi Wang,Jihua Li,Lijing Lin.Food Analytical Methods.2014(8)
[2]Improving peak shapes with counter gradients in two-dimensional high performance liquid chromatography[J].Paul G.Stevenson,Danielle N.Bassanese,Xavier A.Conlan,Neil W.Barnett.Journal of Chromatography A.2014
[3]Rapid and simultaneous quantitation of prostanoids by UPLC–MS/MS in rat brain[J].Jafar Sadik B.Shaik,Tricia M.Miller,Steven H.Graham,Mioara D.Manole,Samuel M.Poloyac.Journal of Chromatography B.2014
[4]HPLC and UPLC methods for the determination of zearalenone in noodles,cereal snacks and infant formula[J].Hyun Ee Ok,Sung-Wook Choi,Meehye Kim,Hyang Sook Chun.Food Chemistry.2014
[5]刘雨思.豆芽中植物生长调节剂测定的色谱方法研究[D].甘肃农业大学,2015.