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差异基因的选择标准是什么?

本人新手,之前没有任何数据分析经验。手上有个转录组的数据需要进一步分析,A样本和B样本部分结果如图表所示:



有2个问题问一下:

1. 差异基因的选择标准是什么?B to A RPKM ratio相差多少倍算是有差异,P-value在这里怎么理解,是否如统计中常见的<0.05就ok吗?
2. 找到上调和下调的基因后怎么处理这批数据?具体是怎么样一个大致流程。尽管看文献中提到做GO分析聚类pathway等,但是还是不太明白具体每一步是怎么操作的,请高手给些指点,最好能举个实例。


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共1个回答
1、差异基因可以用p值来选,有时候可以加上fold change来控制,一般使用1.5倍或者2倍,也可以设更高。不知道你两个样本怎么计算的p值,我也做过这种read是的计算p值的方法,未必和你的一样。你可以用这个p值的。但p值的使用不能简单用0.05,需要用FDR校正后的值。2、没用过GO的话建议你直接用现成的软件,而不是自己去做。有很多现成的免费的GO富集网站和软件,自己去搜吧。还有n多收费的,如genespring,IPA。还可以去看看转录因子富集分析,或者用GSEA,简单漂亮而且效果不错。如果是新手,建议你找个师傅带,否则难。
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