载体GFP标签如何去除？

之前看定位，用了GFP标签载体，后面发现这个标签和后面用到的荧光染料有冲突，想把这个标签去掉，该如何去除？
我查了酶切位点，上游是KpnI下游是Eco53KI，如果用这两个酶双酶切，我需要补齐被切掉的酶切位点片段吗？
之前插入的片段在GFP前面，去掉了终止密码子，可以和GFP融合表达，如果去掉了GFP，我需要补回终止密码子吗？