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做WCX分析纯化后的...
化药
做WCX分析纯化后的抗体蛋白,总是有一些碱性峰问题使纯度达不到要求?
做抗体仿制药方面遇到一些问题,在做WCX分析纯化后的抗体蛋白,总是有一些碱性峰问题使纯度达不到要求。该从哪些地方着手解决。是从培养工艺优化还是从纯化工艺?
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故俗,化工研发
2019-05-05回答
从图中看你的电荷变异情况是比较复杂的。至于是否需要去除,达到很高的纯度,需要与你的原研药做个对比,看哪些峰,酸碱比例是否对应。 对于后两个碱性峰,首先你需要确认是何种引起的,是否是羧肽酶的不完全切除导致K的残留,以及焦谷氨酸环化等引起。 控制,可以从发酵,比如控制金属离子,可以影响羧肽酶的活性。阳离子工艺优化,损失适当的回收率,调节洗脱方式也能得到很好的结果,比如洗脱盐溶度降低,洗脱样品碱性组分含量越低,这也很容易理解。调节pH值的方式对于控制pH值也非常有用。
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