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GST蛋白纯化实验选择什么溶液变性?

包涵体蛋白如何变性?用啥溶液?变性后能否变性液直接过柱?我用的是上海七海生物公司的 GST 纯化预装柱PAG001-005C ,protocol没有相关描述!

   


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共3个回答
包涵体变性后需要用0.45的膜过滤,否则会堵塞柱子
我上个月刚做过这个,也是七海的填料,建议用8M尿素或者6M盐酸胍变性。
先复性再纯化,选择PBS还是TBS作为基础复性buffer,同时可以加入:还原/氧化型谷胱甘肽,L-Arg,甘油等帮助蛋白复性。
你的意思估计是复性后蛋白有沉淀,所以不好过柱、包涵体本身就是纯蛋白,不需要纯化吧    
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