我构建载体，分子验证是对的，什么都是对的，可就是不表达。这是为什么呢？
求助各位，我都构建了一年多了，总是到这步就卡住了，以前怀疑是自己操作有问题，然后开始测序怀疑模板不对，操作应该还好，我周围同学的分子操作还都是我教的，眼看着人家都一个一个的做出来了，我这个心情。。测序结果模板也是对的，所以现在就怀疑是不是引物的问题，关键是引物还是老师给设计的，各位帮我看看：
我用的载体是pET28A,我的酶切位点分别是NcoI,HindIII,NcoI是他的首个酶切位点。
