利用CRISPR/Cas9技术进行植物的基因敲除,敲除的位点在CDS(编码区),结果在靶点处引入了几个碱基的插入或缺失突变,现在的共识是这些少量碱基的插入或缺失(Indel)会导致移码突变,进而破坏掉相应蛋白功能,获得基因功能缺失的表型,也就是说CRISPR/Cas9行使作用是在蛋白水平了。
请问,CRISPR/Cas9引入的少量碱基的突变会影响基因的表达量吗(非可变剪切位点)?我个人觉得RNA水平上几个碱基的改变对基因的表达量影响不大。有人做过相关实验能够证明CRISPR/Cas9基因敲除只是移码突变而不影响基因的表达量吗?
若是CRISPR/Cas9的敲除既产生了移码突变又能够改变RNA水平基因的表达量,又怎样确定某个基因的功能到底是通过RNA还是蛋白行使功能呢?
希望大神能够不吝赐教,万分感谢。