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癌细胞在水凝胶上不贴,这是什么原因?

我做的是NIPAAm型的细胞脱附温敏水凝胶,考虑到NIP本身生物相容性不好,我又加了点OEGMA进行混聚。但是交联剂不溶于水,所以我是先做成有机凝胶然后脱模把凝胶泡水里,每天换水。3-4天后等溶剂完全置换成水了把水凝胶转移到孔板里,泡75%无菌乙醇进行消毒(超净台内操作)。之后把乙醇吸去,泡PBS把残留的乙醇洗掉(PBS泡两天,每天换水)。用培养基预孵后接种癌细胞,密度为10000cell/mL。
实验做了好多遍可癌细胞就是不贴,凝胶上的癌细胞都是圆圆的,而孔板底部的癌细胞贴的很牢(凝胶尺寸比孔板略小一点)。

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共1个回答
泡75%无菌乙醇进行消毒(超净台内操作)。
75%乙醇是杀菌用的所以不需要采用无菌乙醇的提法。
乙醇没有完全清洗干净,细胞的粘附要受很大影响。
不知道你在乙醇里面泡了多久,如果是材料表面灭菌,泡几秒钟就可以,如果你希望乙醇渗透入凝胶里面杀菌,乙醇进去容易,洗脱难!
或许你可以用含500IU/mL双抗的PBS代替乙醇灭菌试试。
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