为什么Cys-Protein G是一种重要的生物化学和免疫学试剂? ¹

背景^[1]

Cys-Protein G是一种细菌蛋白质，来源于某些B-溶血性链球菌菌株的细胞壁。它以高亲和力结合来自各种免疫球蛋白的不同种类和亚类的Fc部分物种。Cys-Protein G与来自人类、小鼠和大鼠物种的所有IgG亚类结合。它还与总IgG结合来自豚鼠、兔子、山羊、牛、羊和马。Cys-Protein G优先结合IgG的Fc部分，但是也可以结合Fab区，使其可用于IgG的F ( ab’)片段的纯化。因为它对许多哺乳动物免疫球蛋白Fc区的亲和力，Cys-Protein G被认为是一种通用试剂生物化学和免疫学。

应用^[1]

Cys-Protein G，类似于蛋白A，是在C组中表达的免疫球蛋白结合蛋白和G链球菌，但具有不同的特异性。它结合到的恒定区域 许多种免疫球蛋白G，可用于检测、定量和纯化IgG 抗体和抗体/抗原复合物。这种重组Cys-Protein G只含有IgG 绑定域。它缺乏白蛋白结合区、细胞壁和细胞膜结合区 确保最大特异性IgG结合能力。重组Cys-Protein G含有196 氨基酸残基，对应于链球菌属和Cys的氨基酸190 - 384 C末端的残基。

重组蛋白相关实验

1、 Cys-Protein G偶联受体的纯化实验

纯化受体从概念上可以分成两步: 第一步用合适的去污剂将受体从膜中提取出来 (增溶）; 第二步使用如常规的亲和标签、与该受体特异结合的配体层析柱、分子排阻色谱和其他方法纯化受体。最重要的是，必须注意选择实验条件以保持膜蛋白在整个纯化过程中处于活性状态。这一点怎么强调也不过分，因为很多 GPCR—旦被去污剂从质膜中提取出来就会变得不稳定。

2、重组 Cys-Protein G的代谢标记实验
由于重组蛋白质表达的时候，宿主蛋白质的合成基本终止，因此体内代谢标记是检测重组蛋白质的敏感方法。

参考文献

[1]Cys-Protein G产品介绍