MMO-MUG培养基是一种用于检测生活饮用水及其水源水中大肠菌群和大肠埃希氏菌的方法。在我国,大肠菌群和大肠埃希氏菌被用作评价生活饮用水、水源水和地表水卫生状况的指标,以此来指示粪便污染。固定底物技术酶底物法是一种快速简便的检测方法,该方法使用MMO-MUG培养基。
原理:固定底物技术酶底物法利用大肠菌群细菌产生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)分解ONPG使培养液呈黄色,以及大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解MUG使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光的原理,来判断水样中是否含有大肠菌群和大肠埃希氏菌。
1、定性试验:取100ml无菌稀释瓶,加入100ml水样和2.7±0.5克MMO-MUG培养基,混合均匀后放入36±1℃培养箱中培养24小时。
2、10管法。
3、51孔定量盘法。
结果:如果水样变黄,则表示含有总大肠菌群。如果培养液在波长366nm紫外光下产生荧光,则表示含有大肠埃希氏菌。
比较多管发酵法(包括乳糖蛋白胨和EC-MUG培养基)与酶底物法(MMO-MUG培养基)在水中大肠菌群和大肠埃希氏菌检测方面的差异,以选择最佳的检测方法。根据《生活饮用水标准检验方法》GB5750-2006的要求,对多管发酵法和酶底物法进行适用性试验、灵敏度试验、水样加标试验和实际水样检测应用。
结果显示,多管发酵法和酶底物法在检测结果上存在一些菌株的差异;灵敏度试验中,酶底物法约为1 cfu/100 mL,多管发酵法约为1 cfu/100 mL;加标试验结果显示三种培养基方法无明显差别;在水样检测中,两种方法的结果差异不显著。结论是多管发酵法和酶底物法在水中大肠菌群和大肠埃希氏菌检测方面的结果没有显著差异,但酶底物法只需一种培养基,在24小时内同时检测出大肠菌群和大肠埃希氏菌的结果,操作更为方便,节约时间并且结果观察直观易懂。
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