如何检测大豆中的异黄酮糖苷? ¹

大豆中含有九种异黄酮糖苷，其中大豆苷、染料木苷、丙二酰大豆苷和丙二酰染料木苷的含量最高。丙二酰染料木苷具有多种功效，包括调节雌激素、抑制与癌症相关的酶活性、消除活性氧基、抗氧化和防治骨质疏松症等。

提取方法

首先，取100mg大豆粉末加入到10ml试管中，然后加入2-4ml的70-80%乙醇。使用振荡器振荡10-20秒后，使用超声波处理15分钟。静置30分钟后，使用离心机以5速2,500转/分钟离心10分钟。取上清液中的1ml移入1.5ml的eppendorf离心管中，再以13,000转/分钟离心5分钟。将上清液中的400-500μl装入HPLC专用小瓶中，进行异黄酮的HPLC分析。

HPLC分析标准方法如下：

使用YMCODS.AM-RP(250x30mm，5pm)分析柱，进样量为5μl。移动相由A(0.1%醋酸水溶液V/V)和B(0.1%醋酸乙睛溶液V/V)组成，采用梯度洗脱。梯度为：0～60分钟，B由10%线性递增至60%，后用90%的B洗脱3分钟，最后用10%的B平衡10分钟。紫外检测波长为254nm，洗脱速度为0.65ml/min，柱温为40℃。在图中显示：在14-17分钟时检测到大豆苷，在24-25分钟时检测到染料木苷，在26-27分钟时检测到丙二酰大豆苷，在34-36分钟时检测到丙二酰染料木苷，在53-55分钟时检测到染料木黄酮。这些峰都是标准物质的峰，而不是从大豆子叶中检测到的峰，所以峰面比较好看。由于大豆种子中染料木黄酮的含量较低，少量样品较难检测到。

主要参考资料

[1] CN201010191832.8 植物营养成分含量的快速提取检测法