胚胎干细胞具有无限增殖、自我更新和多向分化潜能的特性，对于诱导分化、遗传病防治、器官移植等方面具有广阔的临床应用价值。同时，在新基因的发现、新药开发、功能基因的组织学研究、致畸实验等方面也有广泛的应用前景。为了研究和应用胚胎干细胞，选择最优化的细胞培养体系至关重要。饲养层细胞对于胚胎干细胞的自我更新和全能性维持起着重要作用。目前，小鼠胚胎成纤维细胞是胚胎干细胞培养的首选和最常用的饲养层细胞。
1963年建立的3T6-Swissalbino细胞是一种能分泌胶原质和透明质酸的细胞。检测表明，这种细胞不含肢骨发育畸形病毒。3T6-Swissalbino/小鼠胚胎成纤维细胞的培养基为DMEM高糖＋10%FBS＋1%P/S，培养温度为37℃。
在使用3T6-Swissalbino/小鼠胚胎成纤维细胞时需要注意以下事项：
1) 细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如果细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以离心去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如果细胞仍然不贴壁，将细胞离心收集转移到新培养瓶，原培养瓶加入部分培养液继续培养，中间需要注意观察，直到问题解决。
2) 对于生长缓慢的贴壁细胞：可以适当提高培养基中血清浓度，或者每隔一天更换培养液的方法来保证细胞的状态和生长速度。
3) 对于生长不均的贴壁细胞：在培养过程中，如果出现细胞分布明显不均的情况（即某一区域细胞已重叠生长，而旁边则为空白），可以将细胞进行消化，重新打散，贴壁，加入新培养基进行培养。
[1] 小鼠胚胎成纤维细胞的分离培养及饲养层制备
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