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如何分析阿托伐醌? 1

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阿托伐醌是一种重要的药物,对其进行分析研究具有广泛的研究价值。


简述:阿托伐醌(atovaquone)又称阿托喹酮,是一种羟基萘醌类化合物,辅酶Q的类似物,具有广谱抗原虫活性。它通过选择性抑制寄生虫线粒体的细胞色素 bcl的电子传递发挥作用,同时它也被证明能抑制二氢乳清酸脱氢酶(dihydroorotate dehydrogenase,DHODH),导致嘧啶的生物从头合成受阻。


1. 理化性质

阿托伐醌的化学名为2-(反式-4-(4-氯苯基)环己基)-3-羟基-14-萘二酮结构式见下图,分子式 C22H19ClO3,分子质量366.8375为黄色粉末,相对密度:1.35 g/cm’高亲脂性微溶于水。

2. 分析

2.1含量测定:

朱建等人建立紫外分光光度法测定阿托伐醌原料药的含量。方法: 采用紫外分光光度计对阿托伐醌进行波长扫描,确定最适吸收波长,采用标准曲线法测定阿托伐醌的含量。


1)阿托伐醌对照品储备液

精密称取阿托伐醌对照品 6 mg,置于 50 mL 容量瓶中,加入乙腈溶解并稀释至刻度线,定容并摇匀,即制得浓度为 120 μg/mL 的阿托伐醌对照品储备液。


2)阿托伐醌供试品储备液

精密称取阿托伐醌原料药 6 mg,置于 50 mL 容量瓶中,加入乙腈溶解并稀释至刻度线,定容并摇匀,即制得浓度为 120 μg/mL 的阿托伐醌供试品储备液。


3)含量测定

精密量取阿托伐醌供试品储备液 0.7 mL,置于10 mL 容量瓶中,加入乙腈溶解并稀释至刻度线,定容并摇匀,配制成质量浓度为 8.4 μg/mL 的阿托伐醌供试品溶液。照紫外分光光度法在 251 nm 下测定吸光度,平行测定三次,根据标准曲线回归方程计算含量。结果表明,阿托伐醌原料药的平均含量为 99.83%( 表 2) 。

结论:阿托伐醌在 3.6~13.2 μg/mL 范围内线性关系良好,标准曲线方程为 Y = 0.064 9X-0.014 9( r = 0.9993,n = 5) ,其精密度良好,符合方法学要求。紫外分光光度法简单、快速、准确,可用于阿托伐醌原料药的含量测定。


2.2 测定人血浆的阿托伐醌浓度:

曹江等人建立LC-MS/MS测定人血浆阿托伐醌浓度的方法。方法具体为:阿昔洛韦为内标血浆样品经乙腈沉淀蛋白后EclipsePlusC8色谱柱柱温35℃流动相A为乙腈B为水(0.1%乙酸铵)用梯度洗脱其中0~1minA:B(50:50)1.01~4.00minA:B(95:5)4.01~9.50minA:B(50:50)流速:0.3mL·min-1。分离后用电喷雾离子源(ESI)离子化后通过负离子选择用多重反应离子监测(MRM)。


阿托伐醌在20~10000ng·mL-1范围线性良好定量下限为20ng·mL-1提取回收率在92%~105%日内精密度(RSD)≤11.2%、日间RSD均在≤9.18%。该法专属性强灵敏度高操作较以往简单快速定量准确适用于阿托伐醌人体药代动力学研究和治疗药物监测


参考文献:

[1]何维,杨光友. 抗原虫药物阿托伐醌的药理学特性研究进展 [J]. 动物医学进展, 2023, 44 (08): 102-106. DOI:10.16437/j.cnki.1007-5038.2023.08.025.

[2]朱建,常天歌,吴文营等. 紫外分光光度法测定阿托伐醌的含量研究 [J]. 山东化工, 2022, 51 (06): 139-141. DOI:10.19319/j.cnki.issn.1008-021x.2022.06.027.

[3]曹江,梅和坤,白艳等. LC-MS/MS法测定人血浆的阿托伐醌浓度 [J]. 中国临床药理学杂志, 2013, 29 (08): 619-621. DOI:10.13699/j.cnki.1001-6821.2013.08.019.

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