两色金鸡菊(Coreopsistinctoria),又称昆仑雪菊,是一种野生草本植物,属于菊科金鸡菊属。它在维吾尔医医院被广泛用作民族药材,具有活血化瘀、和胃健脾、降压降脂等药理作用。现代药理学研究发现,两色金鸡菊的黄酮类化合物是其主要活性成分。黄诺马苷是其中一种黄酮类化合物,被认为是该药材的有效成分之一。然而,关于黄诺马苷单体的体内外药代动力学研究还相对较少。
1)采用高碘酸钠氧化法将黄诺马苷与牛血清白蛋白(BSA)进行偶联。该方法的原理是将黄诺马苷糖基上的邻二羟基结构氧化为醛基,然后与BSA上的氨基结合,形成稳定的以碳-氮单键连接的结合物。薄层结果显示偶联成功,但免疫小鼠后,间接竞争ELISA结果显示小鼠血清对小分子无特异性。分析认为,可能是高碘酸钠在氧化糖基上邻二羟基结构的同时破坏了黄诺马苷分子中其他邻二羟基结构,或者是BSA的结构不易暴露氨基等原因导致。
2)采用曼尼希法合成黄诺马苷人工抗原,将黄诺马苷与更易暴露氨基的载体蛋白多聚赖氨酸偶联。经薄层色谱法检测,偶联物不随展开剂展开,而停留在点样原点,显示出蛋白特征。经显色剂处理后,在点样处可见明显色斑,与黄诺马苷对照品的颜色一致,说明停留在原点的偶联物同时具有小分子的特征,表明黄诺马苷与载体蛋白偶联成功。
[1] 黄诺马苷在MDCK单层细胞模型上的转运机制分析
[2] 黄诺马苷人工抗原合成及鉴定