考马斯亮蓝是一种常用的蛋白质定量测定方法,它可以与蛋白质结合并产生颜色变化,从而实现蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色,在与蛋白质结合后变为青色,通过测定吸光度可以计算出蛋白质的含量。该方法具有操作简便、快捷、灵敏度高等特点,可以测定微克级蛋白质含量。
考马斯亮蓝G-250显色剂的制备方法如下:
1)将考马斯亮蓝G-250溶解在适量的溶剂中,制备成一定浓度的显色剂。
2)将显色剂过滤,以去除杂质。
3)将显色剂保存在适当的条件下,以保持其稳定性。
考马斯亮蓝G-250法可以应用于多种样品中蛋白质含量的测定,以下是一些应用举例:
1)使用考马斯亮蓝G-250法测定壳聚糖中蛋白质含量。该方法通过与壳聚糖中的蛋白质结合,使溶液变为蓝色,并通过测定吸光度计算出蛋白质的含量。
2)使用考马斯亮蓝G-250法判断牛奶是否掺假。通过测定牛奶在变性沉淀后的吸光度与原始吸光度的比值,可以判断牛奶中是否掺入其他含氮物质。
3)使用考马斯亮蓝G-250法测定果汁中的蛋白质含量。研究发现,果汁中的其他成分不会对测定造成干扰,该方法的测定结果具有较好的精密度和回收率。
4)使用考马斯亮蓝G-250法测定胃液中的蛋白质含量。该方法对于胃液中蛋白质含量的测定具有较高的灵敏度和重复性,可以为胃癌等疾病的诊断提供一定的临床意义。
[1] 考马斯亮兰法测定壳聚糖中蛋白的含量
[2] CN201310582126.X一种用乙醇变性快速测定乳制品中蛋白质掺假的方法
[3] 考马斯亮兰G-250法测定苹果浓缩汁生产中的蛋白含量
[4] 考马斯亮兰G-250法测定胃液蛋白质含量及其临床意义