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基因验证克隆 急急急?

从本实验室三代库里找到了目的基因全长,不用克,只对他进行验证,问题1:验证的时候是选ORF还是CDS进行验证?2.验证用ncbi设引物的时候,引物要不要覆盖整个ORF或CDS?
自己选的ORF进行验证,但也有人用CDS进行验证。这是怎么回事?设引物设了两对,但没有覆盖整个ORF,不知道这样弄对不对?
送测的时候 我送的是pcr未纯化,也就是只看了看电泳条带是一条就送测了,有些人验证基因是阳性菌送测,请问这种情况该怎么选择?

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