After treatment5% C. elegans total RNA was spiked-in followed by phenol-chloroform extraction of the RNA mixture. For controls the RNA was mock treated without the enzyme.
我买的也是epicentre的RNase R，说明书上写每1ugRNA用1U（1个单位）的RNase，37℃ 10min。有个同学按照这个步骤做，做出来结果很理想，就是线性的明显降低，而环状RNA变化不大。具体做法如下：RNase(-)组和RNase(+)组都用RNase(-)组的GADPH作为内参。而我自己做的结果是，线性的RNA降低十分明显，但是环状RNA的结果居然上升了（起峰循环数提前了3个循环，用的是Takara的试剂盒）。目前考虑可能是RNase R buffer里面还有含有Mg2+，这个会增强PCR反应。不知道你们有没有遇到过这种情况。
