用对二甲氨基肉桂醛 (溶于硫酸和甲醇中)作为薄层的指示剂(如果你做生物素的(小分子)衍生物,这个一定要有!),去找到你的紫红色产品点在哪里吧。biotin 有拖尾,biotin-NHS 没有拖尾。反应步骤绝对没有问题,DCC 和 HOSu 可以提升到4个当量。反应的转化度也很高,但产物极性非常大,所以硅胶柱提纯的损失很大,但并不是不可以做 (15-20% MeOH/DCM)。这个反应需要高浓度,此时大部分的 DCU 会从 DMF 中析出,所以要过滤先,乙醚洗是要除去残留的 DMF 和 一些 HOSu,异丙醇重结晶可以除去 DCU 和 HOSu。Biotin 的溶解性很差,但产物溶于 DMF 中。Biotin-NHS 的粗品可以直接用的哟。你要做 biotin-LC-Lys 吗?