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如何测定维生素 K4的含量? 1

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引言:

测定维生素 K4 的含量对于保证其在药物和营养补充品中的有效性至关重要。正确的分析技术能够准确量化维生素 K4 的浓度,以确保符合相关的质量标准。


简述:

维生素K4(VK4)是一种水溶性的甲萘醌化合物,为VK2的人工合成衍生物,最初被用作临床止血药物。近些年已经有研究表明VK与血管健康、骨代谢有着密切关系,VK作为γ-亚麻酸蛋白家族如凝血素、凝血因子Ⅶ、凝血因子Ⅸ和凝血因子Ⅹ合成中的辅因子,在凝血系统中扮演了很重要的角色。

维生素 K 是一类拥有同样甲基萘醌环并且带有不同侧链的有机化合物的统称。有VK1、VK2、VK3、VK4 等几种形式,VK1(叶绿醌)是从绿色植物中提取的,VK2(甲基萘醌)是由肠道细菌(如大肠杆菌)合成的。而 VK3、VK4 是 VK1、VK2 的人工合成衍生物,属水溶性的维生素。VK2 还能根据侧链长短衍生出不同的化合物,被称为甲萘醌—MK-n,n 代表了侧链中异戊烯的个数。VK3 是一种合成的化合物,它缺少一个侧链,但因其能够在体内转化为 MK-4 而具有生物学活性。和营养学关系最密切的甲萘醌是 MK-4 以及 MK-7—MK-9。有证据表明 VK1 能够在体内转化为 MK-4。

VK 为黄色晶体,熔点为 52 ℃ 54 ℃,通常呈油状液体或固体,不溶于水,能溶于油脂及醚等有机溶剂。 所有 VK 的化学性质都较稳定,能耐酸、耐热,正常烹调中只有很少损失,对光敏感,也易被碱和紫外线分解。

膳食中 VK 都是脂溶性的,吸收需要胆汁协助,所以主要由小肠吸收进入淋巴系统,且其吸收取决于胰腺和胆囊的功能,在正常情况下其中约 40-70%可被吸收。其在人体内的半衰期比较短,约 17 小时。


检测:

1. 高效液相色谱法测定维生素K4 的含量

孙兵等人采用YWG-C18柱,以甲醇∶水=85∶15(体积比)为流动相流速为0.5 mL/min,285 nm为检测波长,建立维生素K4(化学名为2-甲基-1,4萘二酚双醋酸酯)的高效液相色谱法。该方法在2~10 μg范围内线性关系良好,相关系数为0.999 8.回收率99.15%~100.8%,相对标准偏差为0.66%。该方法操作简单,分析速度快,结果准确,适用于维生素K4的产品检验。


2. 化学除氧-胶束增稳室温嶙光法测定维生素K4

刘秀萍等人Na2SO3化学除氧的十二烷基硫酸钠(SDS)胶束体系中,T1Ac为重原子微扰剂,进行了维生素K4的室温燐光法(RTP)测定。研究发现样品温度对RTP发射强度有影响,重原子T1/SDS有一个临界比率值为40%,到此临界比率值后能获得高的RTP值。介质pH、Na2SO3、SDS及TlAc浓度不仅影响RTP强度,而且影响体系的除氧速度,最佳pH值范围在7.0~7.8之间,分析校正曲线在1×10-6mol/L~8×10-6mol/L和1×10-5mol/L~4×10-5mol/L呈良好的线性关系,方法的检出限(DL)为2.1×10-6mol/L,相对标准偏差(RSD)为4.4%。


参考:

[1] 孙兵,金丹,臧娜,等. 高效液相色谱法测定维生素K4 的含量[J]. 应用化工,2009,28(4):615-616. DOI:10.3969/j.issn.1671-3206.2009.04.037.

[2] 刘秀萍,袁宏,董川,等. 化学除氧-胶束增稳室温嶙光法测定维生素K4[J]. 山西大学学报(自然科学版),2003,26(1):43-45. DOI:10.3969/j.issn.0253-2395.2003.01.011.

[3] 姜雨. 维生素K4对人前列腺癌PC-3细胞凋亡作用的研究[D]. 辽宁:辽宁师范大学,2013. DOI:10.7666/d.Y2377104.

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