大肠杆菌经过特殊处理后可以摄取外源DNA，这种状态下的细胞被称为感受态细胞。Shuffle T7-B菌株是一种特殊的大肠杆菌菌株，适用于T7启动子启动的蛋白表达。
Shuffle T7-B菌株对氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素和四环素敏感，对链霉素和壮观霉素有抗性。菌株中的二硫键异构酶DsbC有助于正确形成蛋白的二硫键，并具有分子伴侣的功能，可以帮助不含二硫键的蛋白正确折叠。此外，Shuffle T7-B菌株的基因组中没有T1噬菌体序列，具有抗T1噬菌体感染的特点。经过特殊工艺制作的Shuffle T7-B感受态细胞的转化效率大于10的6次方cfu/μg DNA。
Shuffle T7-B感受态细胞应在-70℃保存，避免反复冻融。
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1. 取100μl冰上融化的Shuffle T7-B感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2. 将混合物置于42℃水浴中热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，避免晃动以提高转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后在37℃、200rpm条件下复苏60分钟。
4. 以5000rpm离心1分钟，收集菌块后留取约100μl上清液，轻轻吹打重悬菌块并涂布到含有相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱中过夜培养。
[1] Shuffle T7-B感受态细胞说明书
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