本文将介绍如何测定2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯的含量，旨在为药物噻托溴铵的使用及相关分析化学提供实验支持。
背景：2，2-二噻吩基乙醇酸甲酯，英文名称：methyl 2-hydroxy-2，2-dithiophen-2-ylacetate，CAS：26447-85-8，分子式：C11H10O3S2。2，2-二噻吩基乙醇酸甲酯是生产长效支气管扩张剂噻托溴铵的中间体。
噻托溴铵(tiotropium bromide)是一种抗胆碱药物，由德国柏林格殷格翰(Boehringer Ingelheim)公司研发，与辉瑞(Pfizer)公司共同销售，2 002年6月首次在荷兰和菲律宾上市，主要用于慢性阻塞性肺疾病(COPD)的维持治疗。噻托溴铵与M1和M3受体解离缓慢，能在较长的时间内阻滞胆碱能神经介导的支气管平滑肌收缩，而与M2受体解离速度比较快，故其对支气管平滑肌松弛有良好的选择性，治疗慢性阻塞性肺疾病患者效果显著。
在制备噻托溴铵的过程中，主要有以下几种反应中间体：东莨菪醇、二(2-噻吩基)乙醇酸东莨菪酯和2，2-二噻吩基乙醇酸甲酯。
测定：
陈红等人建立了测定二(2-噻吩基)乙醇酸东莨菪酯和2，2-二噻吩基乙醇酸甲酯的含量的HPLC方法。采用μBondapakTMC18液相色谱柱(3.9mm i.d.×250mm，10μm)，以乙腈/戊烷磺酸钠溶液(35/65，v/v，pH=7.0)为流动相，流速设定为0.8mL.min-1，检测波长为215nm时，实现了这两种酯的良好分离分析。实验方法如下：
1. 溶液的配制
（1）混合标准溶液的配制
准确称取0.004 85 g二(2-噻吩基)乙醇酸东莨菪酯和0.005 15 g 2，2-二噻吩基乙醇酸甲酯，置于25 mL容量瓶中，然后加入70%甲醇水溶液，超声溶解后定容，摇匀，二(2-噻吩基)乙醇酸东莨菪酯储备液浓度为194 μg·mL-1，2，2-二噻吩基乙醇酸甲酯储备液浓度为206 μg·mL-1。
（2）离子对试剂溶液的配制
准确称取0.696 0 g戊烷磺酸钠，置于烧杯中，加入400 mL二次蒸馏水，完全溶解后，用磷酸调节pH至7.0，经G4砂芯漏斗过滤后，超声脱气10 min，配制得到10 mmol·L-1 浓度的离子对试剂溶液。
2. 色谱条件
色谱柱：μBondapakTMC18 液相色谱柱(3.9 mm i.d.×250 mm，10 μm);流动相：乙腈/戊烷磺酸钠溶液(35/65，v/v);柱温：25 ℃;流速：0.8 mL·min-1;进样量：10 μL;检测波长：215 nm;流动相经G4砂芯漏斗过滤后，超声脱气10 min。
结果为：二(2-噻吩基)乙醇酸东莨菪酯的线性范围为1.52～194μg.mL-1，r=0.999 6;2，2-二噻吩基乙醇酸甲酯的线性范围为1.61～206μg.mL-1，r=0.999 6。平均加标回收率及RSD分别为94.43%(RSD 5.66%)和96.21%(RSD 4.39%)。本方法灵敏度高、选择性好、操作简单，可方便地用于监测噻托溴铵合成反应的过程，也适用于检测噻托溴铵中间体含量。
参考文献：
[1]陈红,李来生,方奕珊等.HPLC法测定二(2-噻吩基)乙醇酸东莨菪酯和2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯的含量[J].南昌大学学报(理科版),2011,35(05):447-449+463.
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