与DNA提取类似,分离RNA需要去除其他污染物,如蛋白质和脂类。可以使用有机溶剂将RNA与这些污染物分离。然而,在处理RNA时需要注意几个与DNA不同的方面。大多数细胞类型在细胞质中含有大量的RNA酶,这对于分析提取的RNA至关重要。
为了防止RNA酶降解mRNA,必须立即进行分离,并将细胞裂解物置于RNA酶变性的环境中。可以使用强变性的异硫氰胍(GTC)来实现。新鲜样品或收集的组织可以均匀悬浮并溶解在4mol/L的GTC溶液中。然后,通过CsCl密度梯度离心沉淀RNA,并将其与不能沉淀的DNA分离。接下来,可以使用不同的方法进一步纯化RNA。另一种方法是从均浆的组织中使用变性盐溶液(例如4mol/L的氯化锂)提取RNA。然后,通过苯酚抽提去除均浆中的蛋白质,并用醇沉淀RNA。
植物总RNA大量提取试剂盒采用高效、专一结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲系统,可以快速提取植物组织中的总RNA,并且可以同时处理多个不同样品。该试剂盒操作简单,提取迅速,溶液毒性小,实验安全。提取的总RNA纯度极高,没有蛋白质和其他杂质的污染。
植物总RNA大量提取试剂盒的特点包括:专为植物材料设计,操作更简单、流程更优化;配备高效的DNaseⅠ,可以有效去除DNA污染;配备CS过滤柱,可以有效去除其他杂质;RNA纯度更高,无杂质残留,特别适合对纯度要求很高的下游实验;操作安全可靠,无需苯酚抽提、氯化铯梯度离心或氯化锂/乙醇沉淀。
[1] 分子生物技术导论