沙丁胺醇杂质D是沙丁胺醇合成过程中产生的一种杂质。它保留了β-兴奋剂类母核的化学结构,并引入了可以与蛋白质偶联的-CHO官能团。沙丁胺醇杂质D的合成方法简单,纯度和产率较高。
利用沙丁胺醇杂质D作为原料,可以制备适于动物免疫的抗原体系免疫动物。所得抗体具有较好的效价、特异性和亲和力。这些抗体可以用于酶联免疫试剂盒,可以同时检测克仑特罗、沙丁胺醇、塞布特罗、妥布特罗、溴布特罗和溴氯布特罗等六种药物。该检测方法使用方便,成本低,高效、准确、快速,并且可以同时检测大批量的样本。因此,它适用于组织、肝脏、尿液、血清、饲料、牛奶和奶粉样品中β-兴奋剂类残留的现场监控和大量样本的筛查。
将1.0g沙丁胺醇溶解在20ml N,N-二甲基甲酰胺中,然后加入10%摩尔当量的四甲基哌啶氧化物、10%摩尔当量的四丁基氯化铵和20ml 0.5mol/L的NaHCO3水溶液。在室温下搅拌30分钟后,加入1.1摩尔当量的N-氯代琥珀酰亚胺。在室温下反应2~5小时后,除去大部分溶剂,用乙酸乙酯萃取,洗涤、干燥,然后去除溶剂并进行柱层析纯化,最终得到白色固体沙丁胺醇单氧化物,即沙丁胺醇杂质D。
[1][中国发明]CN201210208642.1β-兴奋剂类半抗原及其制备方法和应用