以0.1%磷酸（pH2.5）为流动相A，以乙腈为流动相B，进行线性梯度洗脱。主峰与未知杂质的分离情况见下图（红框），分不开。0.1%磷酸换为0.1%三氟乙酸，其它的色谱条件不变。主峰与未知杂质有分离迹象，见下图（红框）。增加三氟乙酸的浓度（0.1%→0.4%），以及调整流动相A的pH值（2.5→4.0），主峰与未知杂质的分离满足要求，见下图基线波动较大，由A液相换为W液相，再提高三氟乙酸的浓度为0.5%，主峰与未知杂质达基线分离，见下图（杂质谱与上图不同，是使用调整后合成工艺的原料药，原料纯度较高，并加入已知杂质）分析:由磷酸溶液换为三氟乙酸溶液，可以改善主峰与未知杂质的分离度。是因为在溶液中主峰为阳离子，三氟乙酸为类似离子对试剂，通过离子的相互作用达到分离目的。
