我是做蛋白原核表达的,诱导表达之后用的是超声破碎,破碎效果一直不太好,破好几遍菌液还是很浑,产热也特别严重,而且破一批样品需要一下午,比较浪费时间。
最近正好隔壁实验室新买了一台高压细胞
破碎机UH-06,借用了一下发现效果还不错,在这里分享一下心得体会。
我破的是大肠杆菌,使用的时候压力加到了800 bar,以这个压力破碎了两遍样品就很清澈了,而且跑电泳之后发现蛋白量也比超声破碎时高了一些,分析之后认为应该是高压破碎产热少,出料温度比较低,所以对蛋白的影响会小一些。而使用超声破碎仪破碎之后样品的温度通常会很高,放冰浴里效果也不大。
我的样品量大概有100 mL,在800bar条件下用高压破碎机破两遍也只要10分钟,跟超声破碎比起来就会节省很多时间。
总体用下来还是感觉高压破碎比超声破碎用起来方便一些。但大部分实验室现在都用的是超声破碎,高压破碎机好像知道的也比较少?
有其他用过高压细胞破碎机的大神们也可以交流一下使用心得。