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生物医学工程
如何区分抗体蛋白和目的蛋白?
做IP,之后Western 分析,看到有两条带,在25和50KD左右,应该是抗体的两条带,但是我的目的蛋白也是52KD的,这该怎么区分呢。
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共1个回答
Zj,工艺专业主任
2019-03-14回答
最好是选择与做IP不同来源的抗体来做(比如说IP用鼠的抗体,WB就用兔的抗体),这样就不会检测到抗体的两条带。如果没有不同来源的抗体的话,就要做IP的时候尽量少放点抗体,跑胶跑得远一点,使得目的蛋白能够被看到,不过由于你的蛋白是在是太接近重链了,要分开难度还是很大,这时候就要很慎重,实验过程要十分肯定检测有这么一条目的条带才行。最好还是能找到不同来源的抗体啦
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