我现在在做克隆表达，进行到了将重组质粒导入表达载体阶段，现在遇到的问题是转化后涂板老是不长菌，一个菌落都不长，想请教一下，是什么原因?

可能有几个导致不长菌的原因：
1.感受态细胞是否失活：可以在下次实验时加入阳性对照组，向同批感受态细胞中转入阳性质粒以确认其活性；
2.抗性药物是否错误：重新确认一下重组质粒的抗性，以免用错抗性药物进行菌落筛选，导致不长菌；
3.载体是否正常工作：可以向载体中连入其它已成功连接过的短片段，转化感受态后观察其菌落生长情况，以确定载体是否正常工作。