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铜绿假单孢菌(PA)/绿脓杆菌 PCR检测试剂盒(荧光-PCR法)实验注意事项

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铜绿假单孢菌(PA)/绿脓杆菌  PCR检测试剂盒(荧光-PCR法)实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括*定量和相对定量)和定性分析。
铜绿假单孢菌(PA)/绿脓杆菌  PCR检测试剂盒(荧光-PCR法)主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。

主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl     Taq酶 (2U/μl)
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl

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