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人钙离子通道抗体VGCC的定量检测方法是什么? 1

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人钙离子通道抗体(VGCC)ELISA KIT用于定量检测血清、血浆及相关液体样本中人钙离子通道抗体VGCC的含量。

VGCC试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知VGCC浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将VGCC和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中VGCC活性浓度呈比例关系。

钙离子通道定义:它是一种跨越细胞膜的结构,它严格控制着钙离子进入细胞的过程。由于钙离子信号与很多重要生理功能相关,例如心脏收缩、基因转录等,因此调节钙离子进入细胞的精确反馈机制就至关重要。

为了实现这一功能,每个钙离子通道都与一个钙调蛋白分子(calmodulin CaM)结合,从而通过钙离子与其羧基端小叶(C-lobe)和氨基端小叶(N-lobe)的结合实现对通道活性的调节。

钙调蛋白与钙离子形成的复合物是构成钙离子感受器的重要原型,钙离子感受器与钙离子源密切相关。CaM的羧基端小叶能感应局域的钙离子大幅振荡,这是由于主通道的钙离子流引起的。而氨基端小叶则感应全局的较远距离源引起的钙离子小型改变。然而,尽管以上现象在生物学上非常重要,但其内部机制尚不清楚。

VGCC的应用领域是什么?

用于心肌L型钙离子通道Cav1.3羧基端核转运现象及功能的探究

电压门控钙离子通道(VGCCs)是位于细胞膜上的跨膜异源多聚体蛋白,至少由α1,β,αα2,δ亚基四个亚单位所组成,其中α1是介导钙离子跨膜内流、决定通道门控特性、药物和各种调节因素作用的主要功能亚基。至今已知编码门控钙离子通道а1亚基的基因有10种,根据α1亚基的门控性和生理功能的不同又将通道分为三大类,分别是Cav1、Cav2和Cav3,其中Cav1即电压门控L型钙通道,由Cav1.1、Cav1.2、Cav1.3和Cav1.4四个成员构成,Cav1.1仅在骨骼肌中表达,Cav1.4限于视网膜表达。

而Cav1.2广泛表达于很多组织包括肌肉、大脑、内分泌腺、感觉器官和心脏等中都有表达,Cav1.3则主要表达于神经元、内分泌细胞和感觉器官中。最初人们只认为心脏中的LVCC仅包括Cav1.2,但后来发现Cav1.3在心脏中也有表达,并且优势表达于心房组织、窦房结和房室结中。

Cav1.3基因敲除鼠(Cav1.3-/-)表现出窦性心动过缓和房室传导阻滞现象,所有这些都表明其在维持正常的心脏节律中发挥着至关重要的作用。L型钙通道的α1亚基分子量约为190~250kDa的多肽链,具有4个跨膜结构域、位于胞内的氨基酸和羧基端。已知,VGCC及其介导的Ca2+内流,在基因转录调控中发挥着重要作用。

参考文献

[1] 高瑞.电压门控钠通道亚型Nav1.5在卵巢癌中功能性表达的意义[D].华中科技大学,2009.

[2] 张康.Sigma-1受体对N型钙通道的负性调节作用及其机制研究[D].中国人民解放军军事医学科学院,2017.

[3] 张晨晨.心肌L型钙离子通道Cav1.3羧基端核转运现象及功能的探究[D].南京师范大学,2015.

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