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沙门氏菌显色培养基的应用及改进研究? 1

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沙门氏菌显色培养基是一种用于沙门氏菌分离和初步鉴别的培养基。它可以快速检测食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中的沙门氏菌。除了伤寒沙门氏菌无法直接鉴定外,其他沙门氏菌呈亮红色,大肠杆菌和大肠菌群呈蓝色,枸橼酸杆菌呈紫色,其他细菌呈黄色或无色。

在食品污染中,非伤寒沙门氏菌是主要的沙门氏菌。沙门氏菌显色培养基具有很高的特异性,可达到98%,是一种理想的快速检测培养基。沙门氏菌有2300种血清型,其中肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌约占人类感染的一半。大多数感染可以追溯到奶制品、禽类和肉制品,但沙门氏菌可以在任何食物上生长,尤其是鸡肉、蛋及蛋制品。

沙门氏菌大多数菌种为兼性厌氧菌,不发酵乳糖,但可发酵葡萄糖,产酸产气,过氧化氢酶阳性,氧化酶阴性,革兰氏阴性,有动力。

沙门氏菌的培养基主要基于糖发酵、pH变化、蛋白裂解活性和硫化氢的产生进行区分和鉴别。传统的硫化氢鉴别方法特异性不强,因为一些非沙门氏菌也会产生硫化氢,如柠檬酸杆菌和奇异杆菌,因此需要进行下游的鉴定试验。

用法:

取13g沙门氏菌显色培养基加入200ml蒸馏水,加热煮沸溶解并不停搅拌,加热1-2分钟。冷却至45-50℃时,倾入无菌平皿。

操作步骤

1、按照国家标准、SN标准、FDA标准或其他方法制备样品液;

2、取1ml样品液加入9ml RVS肉汤或其他选择性增菌肉汤中,36℃±1℃增菌培养24±2小时;

3、用3mm接种环取1环增菌液,划线接种到沙门氏菌显色培养基上,做2个平板;

4、36±1℃培养22-24小时,沙门氏菌显紫色,大肠杆菌和大肠菌群显蓝色,其他细菌显黄色或无色;

5、对可疑菌落可划线接种到营养琼脂平板上,36±1℃培养12-16小时,挑取单菌落进行沙门氏菌全套生化试验和血清学试验(本公司有生化鉴定管套装10支x7种)。

沙门氏菌显色培养基的应用

用于食品中沙门氏菌检测方法分析及改进研究

结合国内外相关的沙门氏菌检测方法,我们建立了一种改进的沙门氏菌检测方法。通过对该方法进行有效性和准确性验证,我们发现它与现行有效的国内外标准检测方法具有相同的准确性和特异性,因此可以用于食品中沙门氏菌的检测。

新改进的方法将GB4789.4-2010沙门氏菌预增菌培养时间从8-18小时缩短到8小时,将标准中的两种选择性增菌培养基TTB和SC替换为SX2,将选择性分离培养基从BS和另外一种选择性分离培养基替换为沙门氏菌显色培养基和XLD。改进的方法缩短了12天的检测周期,优化了检测流程,沙门氏菌显色培养基和XLD减少了沙门氏菌检测中常见杂菌的干扰,很多非沙门氏菌可以在这一步被排除,从而减少了生化鉴定的工作量。

参考文献

[1] Adam Schikora, Ana V. Garcia, Heribert Hirt. Plants as alternative hosts for Salmonella. Trends in Plant Science. 2012(5).

[2] Masato Akiba, Masahiro Kusumoto, Taketoshi Iwata. Rapid identification of Salmonella enterica serovars, Typhimurium, Choleraesuis, Infantis, Hadar, Enteritidis, Dublin and Gallinarum, by multiplex PCR. Journal of Microbiological Methods. 2011(1).

[3] Sangyong Lim, Minjeong Kim, Jeongjoon Choi, Sangryeol Ryu. A mutation in tdcA attenuates the virulence of Salmonella enterica serovar Typhimurium. Molecules and Cells. 2010(5).

[4] Minjeong Kim, Sangyong Lim, Dongho Kim, Hyon E. Choy, Sangryeol Ryu. A tdcA mutation reduces the invasive ability of Salmonella enterica serovar typhimurium. Molecules and Cells. 2009(4).

[5] 严婷. 食品中沙门氏菌检测方法分析及改进[D]. 上海交通大学, 2017.

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