823Cells是一种人胃腺癌细胞(低分化),具有上皮样的形态特征,能够在RPMI1640+10%FBS培养基中贴壁生长。细胞的传代比例为1:3,每2-3天更换培养基。细胞可以保存在无血清细胞冻存液中。
在收到细胞之后,先不要打开瓶盖,用酒精擦拭瓶身,然后将瓶子放在培养箱中静置一段时间,以稳定细胞状态。接下来,在倒置显微镜下观察细胞的生长情况,并拍摄不同倍数的照片(建议在收到细胞时拍摄一张整体外观照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,然后在显微镜下拍摄细胞的状态,分别使用100倍和200倍放大倍数)。同时,观察和记录细胞在运输过程中是否受到污染。
复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管放入37℃水浴中快速摇晃解冻,然后加入5mL培养基并混合均匀。在1000RPM的条件下离心5分钟,去除上清液,补充4-6mL完全培养基并充分混合。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中并在过夜的条件下培养。第二天更换培养基并检查细胞密度。当细胞密度达到80%-90%时,可以进行传代培养。
细胞冻存:当细胞的生长状态良好时,可以进行细胞冻存。对于贴壁细胞,先去除培养基,然后加入少量胰酶,使细胞变圆脱落。在1000RPM的条件下离心8-10分钟,去除上清液,然后按照90%FBS+10%DMSO的比例加入血清和DMSO进行冻存。
[1] Bo Leng,Xiao-Dan Liu,Qing-Xi Chen;Inhibitory effects of anticancer peptide from Mercenaria on the BGC-823 cells and several enzymes。《FEBS letters》 2005