提问
盖德化工网  >  盖德问答  >  tris三羟甲基氨基...

tris三羟甲基氨基甲烷在DNA提取中的重要作用是什么? 1

0评论 +关注
共1个回答

由于DNA提取是一个pH敏感过程,使用tris缓冲液有助于在细胞裂解和提取过程中保持pH稳定。然而,我们需要了解特定Tris缓冲液在DNA提取中的作用。这样,可以更好地保护DNA在DNA提取过程中免受pH变化的影响。

Tris作为缓冲液对于维持稳定的pH值在实验科学中至关重要。三(羟甲基)氨基甲烷的pKa为8.1,是pH 7和9之间的有效缓冲液。由于其中性范围,Tris是生物实验室中常用的缓冲液。然而,tris缓冲液对温度敏感,应在其初始pH值的温度下使用以避免不准确。

细胞裂解是DNA提取的第一步。这是用含有tris和EDTA(乙二胺四乙酸)的缓冲液完成的。由于这些离子有助于维持细胞膜的完整性,用EDTA去除它们会破坏细胞膜的稳定性。Tris是主要的缓冲成分;它的主要作用是将缓冲液的pH值维持在一个稳定点,通常为8.0。此外,tris可能与膜中的LPS(脂多糖)相互作用,进一步破坏膜的稳定性。

当细胞分裂时,它们的DNA和内容物会溢出到缓冲液中。细胞内容物中RNA和蛋白质的这种碎片化会对溶液的pH值产生很大影响。由于DNA对pH值敏感,因此必须缓冲Tris以将pH值保持在稳定点。

在DNA提取的最后阶段,DNA本身会从溶液中提取出来。此时,DNA可溶于缓冲液。对于从溶液中提取,加入乙醇或异丙醇(异丙醇)不溶DNA。完成后,DNA在溶液中变得明显,呈白色丝状物质。虽然DNA可以通过这种方式从剩余的细胞成分中分离出来,但当它不溶时就不能使用。分离后,酒精被去除,DNA在使用前必须放回Tris缓冲液中。

在众多缓冲区中,Tris(特里斯)一直是首当其冲的。但真正做好Tris产品,并不像表面上那么光滑。

国内供应商(454家)
三羟甲基氨基甲烷相关回答
您可能感兴趣的问答
 
请填写举报原因
选择举报原因
 
增加悬赏
剩余能量值
能量值