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如何使用CAMHB肉汤进行需氧微生物快速增菌培养? 1

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CAMHB肉汤是一种用于临床样本或其他样品中需氧微生物快速增菌培养的培养基。需氧生物是指只能在氧充足的环境中生长繁殖的生物。它们需要从大气中获取充足的游离氧来分解有机物并获得能量。

该肉汤的成分包括牛肉浸粉、酸水解酪蛋白、可溶性淀粉、氯化钙等,pH值为7.3±0.1。

使用方法是取22.0克CAMHB肉汤加热溶解于1000毫升蒸馏水中,分装后进行高压灭菌,备用。

CAMHB肉汤是一种阳离子调节肉汤(cation-adjusted Mueller-Hinton broth),是药敏试验中推荐的培养基。它具有以下特点:①显示良好的药敏试验批间重复性;②对某些抑制物的抑制作用较小;③已积累了大量的药敏试验数据和经验;④可以支持绝大多数非苛养病原菌的生长,添加特定补充物后也可以支持苛养菌的生长。

CAMHB肉汤在哪些研究中可以应用?

它可以用于研究拉曼光谱技术快速筛查耐粘杆菌素大肠杆菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌。

粘杆菌素(多粘菌素E)是一种可以有效治疗多种革兰阴性菌感染的药物。然而,由于其肾毒性和神经系统毒性较大,一度被弃用,因此目前粘杆菌素耐药现象较为罕见。传统观点认为粘杆菌素耐药主要通过细菌染色体介导,在菌株间垂直传递。

然而,鲍曼不动杆菌或铜绿假单胞菌等多药耐药革兰阴性菌的感染往往危及病人生命,快速准确地分析其对粘杆菌素的敏感性可以有效辅助治疗,挽救患者生命。因此,建立一种有效的粘杆菌素耐药快速检测方法对应对可能出现的“无药可救”的多药耐药革兰阴性菌感染紧迫局面至关重要。

目前,美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute CLSI)和欧盟药敏试验委员会(The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing EUCAST)推荐的粘杆菌素药敏试验标准方法是微量肉汤稀释法(Broth Microdilution Method BMD)。

然而,该方法耗时且需要细菌经过纯化培养后再培养16-24小时才能得到药敏试验结果。纸片扩散法和E-test法同样需要16-24小时,且其检测原理基于药物在琼脂糖中的扩散。由于粘杆菌素分子在琼脂糖中扩散速率较慢,导致药敏结果出现较高的假阴性率。

因此,需要建立一种新的方法来快速筛查大肠杆菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的粘杆菌素耐药菌株。

该方法利用主成分分析方法分析暴露组与非暴露组之间拉曼光谱的差异,获取不同浓度的细菌菌液混合试样的拉曼光谱,测定细菌培养液中蛋白质、核酸浓度及细菌数量,以说明引起暴露组与非暴露组光谱差异的物质基础。同时,获取相同数量的暴露组细菌与非暴露组细菌的拉曼光谱,以说明流失的蛋白质和核酸等物质对试样拉曼光谱变化的贡献。

参考文献

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