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溶质色谱展宽的影响因素是什么? 1

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当溶质的色谱展开进行时,溶质谱带总是会展宽。这种展宽对溶质的分离是有害的,因此HPLC理论致力于研究导致展宽的各种因素。第2章将详细叙述谱带展宽的动力学。在此只简单叙述如何衡量柱子的“好坏”,即谱带展宽的程度。

我们只考虑线性洗脱色谱的谱带展宽,即吸附一分配等温线为直线部分(高斯形峰)的情况。从图1-3可知,在非线性条件下,必然形成具有反常特性的非对称形流出峰。
对于高斯形峰,图1-4显示了峰宽和标准偏差之间的关系,可以用任何一条关系来求得标准偏差。
假定溶质谱带以很窄的带状(理想情况)加到柱的顶端,它比洗脱的谱带窄得多。当这一谱带通过色谱床时,各分子受到不同的约束,因而谱带总的迁移速度是V谱带+⊿V,在此V谱带是谱带中心的速度。
这种与谱带平均速度的偏差,是由于各种分子通过柱子期间的路径长度不同所引起。
谱带展宽量是对柱的制备方法好坏的量度,柱效率则用数字描述了谱带的展宽量。
柱效率或理论塔板数N可自色谱图求得。
N=(tRι/óι)
式中tRι是谱带中心洗脱所需时间,óι是以时间单位表示的这一谱带的变度。N是纯数字。
用保留体积或保留距离来表示t和σ常常更方便些,这时得到类似的方程:
N=(VR/σv)
N=(dR/σà)
塔板数N衡量整个色谱床的效率(包括柱外影响,设计得好的系统中这一影响是很小的)。柱效率的另一计量是以塔板高度H(或HETP)来表示:H=L/N,式中L是柱(更严格地说是柱床)的长度,H具有长度因次(常用毫米)。
“塔板数”和“塔板高度”二词起源于Martin和Synge的“理论塔板模型”,这些名称在色谱法中已广泛用于描述柱效率。
Knox引入了“换算塔板高度”的概念,它和个称为“换算速度”的量值一起,能对各种柱填充物进行系统的比较,即使填充物类型很不相同也可进行比较。
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