如何制备啶虫脒半抗原并应用于动物免疫? ¹

N-去甲基啶虫脒是一种用于制备啶虫脒半抗原的化合物。啶虫脒是一种新烟碱类杀虫剂，通过对昆虫的神经突触后膜内的乙酰胆碱受体产生作用，从而有效杀灭昆虫。它对蚜虫、叶蝉、烟粉虱、潜叶蛾等害虫具有理想的防治效果，是一种广谱、高效、低毒的杀虫剂，被广泛应用于实际生产生活中。

制备步骤

制备啶虫脒半抗原的具体步骤如下：首先取N-去甲啶虫脒0.50g，加甲醇50mL溶解，然后加入氨基丁酸0.30g进行搅拌。接下来，加入37%甲醛水溶液0.37mL，继续搅拌混匀，并在80℃下反应4小时。停止反应后，通过旋蒸除去甲醇，再加入水50mL和乙酸乙酯100mL进行萃取，萃取三次后合并有机相，再通过旋蒸蒸干。最后，通过硅胶柱进行分离，使用二氯甲烷/甲醇（V/V，10/1）洗脱，得到半抗原产物羧基啶虫脒0.69g。

应用

制备好的啶虫脒半抗原可用于制作动物免疫的抗原体系原料。具体制备方法如下：首先取半抗原羧基啶虫脒11mg，加入二甲基亚砜1mL溶解，然后加入氯甲酸异丁酯0.18mL和三乙胺0.1mL，在0~4℃下反应1小时，得到半抗原活化液A液。接下来，取BSA50mg，加入0.8%盐水3mL溶解，得到B液。然后将A液滴加到B液中，继续搅拌反应5小时。最后，使用0.02mol/LPB透析纯化3天，每天换液3次，得到免疫原，分装后在-20℃保存。

主要参考资料

[1] (CN109111394)一种啶虫脒半抗原与抗原的制备方法及应用