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Anti-IL6R抗体的应用及其在肿瘤细胞生长中的作用? 1

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背景[1-3]

Anti-IL6R抗体是一种能够特异性结合IL6R的单克隆抗体,广泛应用于多种免疫学实验,如Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。

检测原理:采用双抗体夹心法来测定样本中IL6R水平。首先,在微孔板上包被纯化的IL6R抗体,形成固相抗体。然后,依次加入IL6R和HRP标记的IL6R抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后,加入底物TMB进行显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,然后在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中的IL6R浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),可以计算出样品中IL6R的浓度。

托珠单抗是一种人源化IL-6受体(IL-6R)的单克隆抗体,可以抑制促IL-6信号通路,阻止外周B细胞异常活化。然而,硫唑嘌呤是一种免疫抑制药物,用于治疗NMOSD,但会导致副作用,如白细胞降低和肝功能异常。

NMOSD是一种中枢神经系统自身免疫性疾病,以反复发生的视神经炎和脊髓炎为主要特征。

应用[4][5]

MicroRNA-451通过下调IL6R基因表达以抑制肿瘤细胞生长的研究

人类miR-451在许多肿瘤中表达下调,研究发现miR-451可能在肿瘤发生过程中具有重要的调控作用,类似于肿瘤抑制基因。本研究旨在通过各种方法揭示miR-451的调控机制。首先,通过预测软件对miR-451的靶基因进行筛选。然后,将miR-451模拟物转染到RKO和Hela细胞系中,通过检测细胞增殖、细胞周期、侵袭能力以及在HUVEC细胞中的血管形成能力来评估其影响。

同时,通过实时定量PCR、Western Blot和RNAi途径检测其靶基因白介素6受体(interleukin6receptor,IL6R)的表达。结果显示,转染miR-451模拟物后,RKO和Hela细胞系中IL6R基因的mRNA表达水平和蛋白表达水平显著下调,细胞增殖和RKO细胞的侵袭能力也受到抑制。

此外,转染miR-451模拟物后,人脐静脉内皮细胞的血管形成能力也显著抑制。以上实验结果在转染si-IL6R片段的实验组中得到了验证。

结论:IL6R基因是miR-451的一个靶基因,miR-451通过抑制IL6R信号通路来抑制肿瘤的发生和发展。

参考文献

[1] Human Mesenchymal Stem/Stromal Cells Cultured as Spheroids are Self‐activated to Produce Prostaglandin E2 that Directs Stimulated Macrophages into an Anti‐inflammatory Phenotype[J]. Joni H.Yl?stalo,Thomas J.Bartosh,Katie Coble,Darwin J.Prockop.STEM CELLS.2012(10)

[2] MicroRNA-137,a HMGA1 Target,Suppresses Colorectal Cancer Cell Invasion and Metastasis in Mice by Directly Targeting FMNL2[J]. Li Liang,Xianzheng Li,Xiaojing Zhang,Zhenbing Lv,Guoyang He,Wei Zhao,Xiaoli Ren,Yuling Li,Xiuwu Bian,Wenting Liao,Wei Liu,Guangying Yang,Yanqing Ding.Gastroenterology.2012

[3] Diet-derived polyphenols inhibit angiogenesis by modulating the interleukin-6/STAT3 pathway[J]. Sylvie Lamy,Naoufal Akla,Amira Ouanouki,Simon Lord-Dufour,Richard Béliveau.Experimental Cell Research.2012(13)

[4] Deregulated microRNAs in multiple myeloma[J]. Leonidas Benetatos,George Vartholomatos.Cancer.2012(4)

[5] 刘栋.MicroRNA-451通过下调IL6R基因表达以抑制肿瘤细胞生长的研究[D].华中科技大学,2012.

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