人髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒是一种用于测定标本中人髓过氧化物酶（MPO）水平的双抗体夹心法。该试剂盒利用纯化的人髓过氧化物酶（MPO）捕获抗体制成固相抗体，通过与HRP标记的检测抗体结合形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加入底物TMB显色。通过测定吸光度（OD值）并参考标准曲线，可以计算样品中人髓过氧化物酶（MPO）的含量。
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；样本孔加待测样本50μL。
3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
该研究通过将人髓过氧化物酶MPO的cDNA克隆到带有6个组氨酸的供体质粒上，获得含人MPO基因的重组供体质粒。然后在大肠杆菌BmDH10Bac中和家蚕杆状病毒基因组杆粒（Bacmid）于转座子（Tn7）上发生转座，通过蓝白斑筛选出带有目的基因的克隆。随后在家蚕BmN细胞中制备含人MPO基因的重组病毒。最终通过镍-柱亲和层析结合离子交换层析的方法进行分离纯化，获得目的产物人髓过氧化物酶。
研究结果表明，重组人MPO能够在家蚕体内得到很好的表达和包装，蛋白质翻译后的（糖基化）修饰良好，分离纯化后的蛋白比活性达396.7±41.7 milliunits/mg，并且能够被病人阳性血清所识别。
利用家蚕-杆状病毒表达系统在五龄家蚕中制备的人重组MPO具有与来源于人嗜中性粒细胞表达的MPO相当的比活性，且表达量高。平均每条蚕可制备高达1.7微克左右的目的蛋白。此方法具有成本低的优势，避免了昆虫细胞培养所需的昂贵培养基和胎牛血清，且家蚕饲养简单方便。
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