蛋白质印迹试剂盒是一种用于检测蛋白质的方法，它将蛋白质转移到膜上，并利用抗体进行检测。对于已知表达蛋白，可以使用相应的抗体进行检测，对于新基因的表达产物，可以通过融合部分的抗体进行检测。
蛋白质印迹试剂盒采用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法，与Southern或Northern杂交方法类似。被检测物是蛋白质，"探针"是抗体，"显色"则使用标记的二抗。
经过PAGE分离的蛋白质样品会转移到固相载体上，例如硝酸纤维素薄膜。固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，并且能够保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性。
通过与固相载体上的蛋白质或多肽进行免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体反应，可以通过底物显色或放射自显影的方法来检测电泳分离的特定蛋白质成分。该技术也广泛应用于检测蛋白质水平的表达。
该研究使用SMMC-7721细胞系CD133+肝癌球细胞作为肝癌干细胞模型。通过ELISA、蛋白质印迹、定量逆转录PCR（qRT-PCR）和甲基化特异性PCR（MSP）等方法比较了SMMC-7721细胞和肝癌干细胞的DNMT1活性、蛋白质和mRNA表达、miR-34a-5p表达以及启动子甲基化水平。
通过球形成法、琼脂集落形成法、流式细胞术分析、蛋白质印迹法和qRT-PCR等方法，检测了SMMC-7721细胞和肝癌干细胞的肝癌球形成率、集落形成率、CD133阳性细胞百分率、CSCs标志物（CD133、CD44和ALDH1）以及多能性转录因子（Bmi1、Sox2和Oct4）的蛋白质和mRNA表达水平。
通过裸鼠移植瘤生长速率和CD133及CD44蛋白表达的测定，评价了肝癌干细胞的特性。利用地西他滨（DAC）和DNMT1 shRNA或DNMT1cDNA等方法抑制或过表达DNMT1基因，确定了DNMT1在促进肝癌干细胞特性以及抑制FVTF介导的肝癌干细胞特性中的作用。
通过miR-34a-5p模拟物和抑制物的应用，鉴定了miR-34a-5p在促进肝癌干细胞特性以及FVTF抑制肝癌干细胞特性中的作用。使用荧光素酶报告基因、FoxM1敲低或过表达、DAC或硫链丝菌素（THI）处理等方法，鉴别了miR-34a-5p的靶基因FoxM1以及FoxM1在促进肝癌干细胞特性以及FVTF通过下调FoxM1表达抑制肝癌干细胞特性中的作用。
在拓展性研究中，使用MHCC97H细胞系肝癌球细胞作为肝癌干细胞样细胞（LCSLCs），并明确了DNMT1/miR-34a-5p/FoxM1信号轴在MHCC97H细胞系LCSLCs的表型和功能以及FVTF的药理作用。通过TCGA和GEO数据库肝细胞癌队列的生物信息学分析，评价了DNMT1/miR-34a-5p/FoxM1信号轴在肝细胞癌发生和肝细胞癌病人预后中的作用。
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