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膜蛋白用什么试剂盒提蛋白比较好?

一直在用普利莱的总蛋白提出试剂盒提蛋白,其他的都做出来了,就是两个膜蛋白很难做出来,也不是完全做不出来,就是用很高的蛋白浓度,上很大的样本量才能勉强做出来。否则几乎没有条带,检测过抗体问题,做免疫荧光之类的很容易做出来。就是这个WB,很难做。怀疑是不是蛋白提出的问题?所以请问大家都是用什么试剂盒提的膜蛋白比较好用?


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膜蛋白提取去年我做过一个,刚开始也是用通用的提总蛋白的试剂抽提,提了三次,折腾了挺长时间,最终没做出来。可能本身这个蛋白表达量低,还有就是按原理摸索的方法没到位。其实主要也是为省点钱,不用试剂盒自己摸索需要尝试多种去污剂、蛋白酶抑制剂混合物或磷酸酶抑制剂混合物等等,而且不用盒子一般都是需要用到超高速(10万-20万转)离心,当时也没这条件,问过其它公司超高速离心机,用一次要多少钱什么的。所以我的感受就是做膜蛋白还是尽量用专门用于膜蛋白提取试剂盒,有条件要用进口的,其实算下来,还是用现成的合适。而且有些国产的很便宜的所谓膜蛋白提取盒子别信,上过当。
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