各位老师同学，我遇到了一个麻烦，本来将目的基因（2100 bp左右）连接到pET-20b（3700 bp左右），连接后转化到大肠JM109中，挑取的菌落活化后提质粒双酶切，发现条带是对的（第一幅图）；但是保存菌种后过了大概一个月，我再将菌提质粒，送去测序，测序公司说测序比较困难，下次提交样品需注明困难模板；最后坎坎坷坷测序证明是对的。但是跑电泳发现条带有一条非常大，已经到8000了，而且单酶切，双酶切后条带位置也都不对了（第二幅图）。请问可能是哪里的原因呢。
核酸电泳图.jpg
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